Dr. Pierre-Alain Girod (jusqu'en 1999) |
adresse actuelle: Laboratoire de Biotechnologie Moléculaire UNIL-EPFL, 1015 Lausanne |
Dr. Christian Richard (jusqu'en 1999) |
adresse actuelle: Laboratoire Cantonal (Canton de Vaud) - Epalinges |
A l'occasion de notre étude du protéasome de la mousse Physcomitrella patens, nous avons achevé la reconstruction en 3D du protéasome 20S de mousse à partir des images de cryo-microscopie obtenues précédemment (en collaboration avec léquipe du LAU Prof. J. Dubochet). Il apparaît que les deux extrémités sont distinctes et que la particule est donc orientée. Par ailleurs, nous avons effectué une analyse structure/fonction de la sous-unité zêta du protéasome 20S par complémentation du mutant nul DOA5 de S. cerevisiae avec différentes versions du gène zêta de P. patens, dont il ressort que la région N-ter ainsi qu'un court domaine interne, constitué dacides aminés acides et localisé à linterface du canal central, sont essentiels à la survie de S. cerevisiae. En revanche, la suppression de l'extrémité C-ter de la protéine naffecte pas la croissance de S. cerevisiae.
Notre étude du facteur Mcb1 (sous unité du protéasome 26S) sest poursuivie avec lanalyse du mutant "knockout " de P. patens, en particulier par la complémentation de ce mutant avec différentes versions du gène Ppmcb1. Nous avons aussi analysé l'effet des cytokinines et des auxines sur la formation et le développement des gamétophores chez KOMCB1 et le type sauvage. Rappelons ici que le mutant KOMCB1 est, chez les eucaryotes, le premier mutant de ce type qui manifeste un phénotype caractéristique.
Dans le cadre de ce projet, le Dr P.A. Girod a contribué de manière significative à lavancement de nos connaissances sur la recombinaison homologue chez Physcomitrella patens.
Hongyong Fu, Pierre-Alain Girod, Jed H.Doelling, Steven vasn Nocker, Mark Hochstrasser, Daniel Finley& Richard Vierstra, 1999 "Structure and Functionnal Analyses of the 26S Proteasome Subunits from Plants" Molecular Biology Reports 26: 137-146